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Cornes utérines
Introduction sur la préparation
Je vais vous présenter mes lames de Cornes utérines. Il faut prélever sur des souris qui viennent d’être euthanasiées. Faire une fixation chimique pour conserver l’état initial, grâce à du Carnoy. Après le temps de fixation, on élimine les fixateurs, on fait des rinçages dans des bains d’alcool 100. Une déshydratation est nécessaire pour l’inclusion en paraffine car elle est hydrophobe. On fait donc 2 bains d’alcool 100 pendant 1 heure chacun. On va ensuite inclure pour imprégner totalement l’organe et parfaire sa rigidité indispensable pour couper l’organe. On fait donc 2 bains de butanol pur (pour enlever l’alcool), on rajoute de la paraffine dans le deuxième bain de butanol, puis on fait 2 bains de paraffine pure. On procède ensuite à l’inclusion réelle en bloc rigide, à l’aide de barres de Leuckart. On fait ensuite des coupes au microtome (5 µm d’épaisseur), après taille du bloc en forme pyramidale. On obtient des rubans de coupes, que l’on dépose sur une lame, sur laquelle on a déjà déposé de l’eau albumineuse (Albumine-glycérine, eau et hydroxybenzoate de méthyle). On rajoute quelques gouttes d’eau distillée pour défroisser. On place la lame sur platine chauffante pour sécher, puis dans l’étuve à 37°C pendant 24h. On doit ensuite réhydrater l’organe pour le colorer, car les colorants sont aqueux, et que la paraffine est hydrophobe. On doit donc déparaffiner à l’Histolémon. On utilise ensuite les batteries de Borels pour réhydrater. On fait ensuite le montage final, pour l’observation, avec le baume du Canada, qui a un indice de réfraction proche du verre (1.55), est amorphe, et ne cristallise pas avec le temps. Mais il est hydrophobe et non miscible à l’alcool. On doit donc déshydrater les échantillons, avec les batteries de Borels en sens inverse et de l’Histolémon. On dépose alors le baume sur la lamelle, qu’on retourne sur la lame, on laisse sécher 24h à 37°C.
Présentation de l’organe
Localisation : Appareil génital femelle.
Rôle physiologique : Entre oviducte et vagin, correspondent à utérus chez femme, bifide pour beaucoup de bébés
Présentation macroscopique :
Présentation microscopique
Lames
CU entières au trichrome x40 Couche compacte et lumière x600
Périmètre et myomètre x600 Couche basale x600
Couche spongieuse x600
Coloration (Pourquoi ?)
Trichrome en 1 temps : composition : Azorubine S (E 122) (noyaux en rouge/rose), acide phosphomolybdique, vert solide (vert lumière très pur) (prend sur les fibres de collagène et les structures riches en mucopolysaccharides), solution aqueuse saturée en jaune Naphtol (structures acidophiles), acide acétique (fixation des colorants). Ici, réel intérêt pour l’observation des BEB, noyaux.
Autre coloration sans intérêt.
Structures (Ouverture physiologique)
Séreuse, musculeuse, sous-muqueuse, muqueuse.
Périmètre : séreuse, une seule couche de cellules mésothéliales, fine couche de tissu conjonctif. Ligament large vers péritoine.
Myomètre : couche massive de muscles lisses, tissu conjonctif.
Endomètre : épithélium, couche spongieuse, couche basale.
Epithélium : cylindrique simple, cellules ciliées et cellules glandulaires (caliciformes).
Glandes utérines séparées par stroma contenant glandes tubuleuses, cellules étoilées, fibre de réticuline devient la lame basale.
Critique de la coloration (Qualité, choix)
Coupe très moche.
